У експериментима ћелијске културе пипете се веома често користе, а тачност њиховог рада директно утиче на поузданост и поновљивост експерименталних резултата. Следе неки савети за рад пипете у ћелијској култури, којим се надам да ће вам бити од помоћи за ваш експеримент.
1. Изаберите праву пипету и врх
- Избор пипете: Изаберите праву пипету према обиму течности коју треба пренети. Нормални опсег оперативног обима од већине пипета је 10-100% назначеног распона. Покушајте да избегавате да поставите јачину пипете на мање од 10% максималне запремине и користите пипету малих домета за операције пипетије мале количине.
- Одабир типова: Изаберите савет који одговара пипету и осигурава да врх буде чврсто убачен да би се избегло пропуштање ваздуха. Поред тога, за одређене експерименте (као што су асептичка операција), треба одабрати аутоклавирани савети.
2 Исперите врх
Исперите врх 2-3 пута да бисте формирали хомогени филм у сапуном, на тај начин побољшавајући тачност пипетирања. Поред тога, може да неутралише капиларно ефекат у микропипете, који може да направи температуру унутар врха у складу са температуром узорка за цевоводника великог обима. Треба напоменути да испирање може имати негативан утицај на резултате када се топле и хладна решења.
3. Контролишите брзину тежње и диспензије
- Глатко притискање: Притисните и отпустите контролно дугме глатко и континуирано, уместо да га изненада притиснете и отпустите. То може избећи формирање мехурића и побољшати тачност пипетирања.
- Пауза: Након аспирирања течности оставите врх у течност око 1 секунде, посебно за те вискозне течности. Одмах извлачење врха може резултирати непотпуном течном тежњом.
4. Обратите пажњу на дубину зароњења врха
- Микропипетте: Савет треба да буде уроњен 2-3 мм.
- Пипета великог распона: Дубина уроњења треба да буде 5-6 мм. Ако је врх уроњен превише дубок, ваздух унутар врха биће компримиран, узрокујући превише течности да се аспирише. Течност која остаје на површини врха може такође утицати на резултате.
5. Вертикална операција
Уроните пипету у узорку као вертикално, пожељно без одступања од вертикалног положаја за више од 20 степени. Поред побољшања тачности запремине пипете, то такође може спречити да течност прође у пипету због превеликих нагињања.
6 Придржавајте се врх пипете
Када се припремате за пражњење течности, обратите пажњу да ли постоје вишак капљица причвршћених на површину врха пипете. Након испуштања течности, врх врха пипете може се додирнути на бочној страни контејнера како би се осигурало довољно темељито да спречи да се последња капа течности остане на врху врха врха пипете.
7. Изаберите одговарајући метод цепети
- Позитивна метода усисавања: Погодно за већину течности. Приликом сисања течности притисните дугме на прву СТОП ТОЧКУ, а затим полако отпустите дугме да бисте се вратили на почетну тачку. Затим притисните дугме на прву зауставу да бисте испразнили течност, паузирајте неко време и наставите да притиснете дугме на друго заустављање да бисте извукли преосталу течност. Напокон отпустите дугме.
- Начин усисавања уназад: Погодно за високо вискозне течности, биолошки активне течности, лако пењене течности или изузетно мале количине течности. Прво сисајте у више течније од постављеног распона и не извадите преосталу течност приликом преноса течности.
8 Држите пипету чисто и одржаване
- Редовна калибрација: Након употребе пипете током одређеног времена, то је потребно калибрисати како би се осигурала његова тачност.
- Чишћење: Након сваке употребе, пипета треба да буде очишћена на време да се избегне преостала течност од контаминације наредног експеримента.
9. Асептичка операција
У ћелијској култури, асептичка операција је веома важна. Када користите пипету, обратите пажњу на следеће тачке:
- Дезинфекција: Пре употребе, обришите пипету и врх алкохолним памучним куглом за дезинфекцију.
- Избегавајте унакрсну контаминацију: Користите нови савет за сваки узорак да бисте избегли унакрсну контаминацију.
Помоћу горе наведених савета можете користити цетилне културне експерименте прецизније и побољшати поузданост и поновљивост експерименталних резултата. Надам се да ће вам ови савети помоћи!